總結(jié)是對過去一定時期的工作、學習或思想情況進行回顧、分析，并做出客觀評價的書面材料，它有助于我們尋找工作和事物發(fā)展的規(guī)律，從而掌握并運用這些規(guī)律，是時候?qū)懸环菘偨Y(jié)了。優(yōu)秀的總結(jié)都具備一些什么特點呢？又該怎么寫呢？下面是小編整理的個人今后的總結(jié)范文，歡迎閱讀分享，希望對大家有所幫助。
細胞工程實驗總結(jié) 細胞工程實驗設計篇一
2．了解甲基綠-派洛寧、中性紅-詹姆斯綠的染色原理和著色現(xiàn)象。
3.掌握細胞核、線粒體等細胞器的染色方法。
[ 實驗原理] 球形顆粒的沉降速率取決于其密度、半徑、介質(zhì)黏度和離心力。
差速離心法（differential centrifugation）是將細胞勻漿在密度均一的介質(zhì)中從低速到高速離心，較大顆粒先在低速離心時沉淀，再用高速離心上清液中的小顆粒物質(zhì)，從而達到逐級分離細胞器的目的。
細胞器的分離常通過組織細胞勻漿、分級分離和分析三個步驟完成。
分級分離方法有兩種，即：差速離心法和密度梯度離心法。
細胞器沉降先后順序是細胞核、線粒體、溶酶體和替他微體、核糖體和大分子物質(zhì)。
線粒體內(nèi)膜上分布細胞色素氧化酶，能使詹納斯綠 b 燃料保持在氧化狀態(tài)呈現(xiàn)藍綠色，而胞質(zhì)中的顏料被還原成無色。
[ 實驗用品] 1．器具：勻漿器、高速冷凍離心機、天平、普通光學顯微鏡、1.5 ml ep 管、載玻片、10 ml 滴管、冰盒、冰塊、濾網(wǎng)、染缸、20 ml 燒杯。
2．材料：動物肝臟。
3．試劑：生理鹽水、pbs、0.25 mol/l 的蔗糖溶液、0.34 mol/l 的蔗糖溶液、0.88 mol/l 的蔗糖溶液、95%乙醇、丙酮、甲基綠—派洛寧、中性紅—詹納斯綠、蒸餾水、冰。
4.甲基綠-派洛寧染液：
0.2mol/l 醋酸緩沖液(ph4.8)：冰醋酸 1.2ml，加蒸餾水至 100ml；醋酸鈉 2.72g 溶于 100ml 蒸餾水中;使用時兩液按 2：3 比例混合.a液：5%派洛寧水溶液4ml、2%甲基綠水溶液14ml、蒸餾水16ml；b液：0.2mol/l。醋酸緩沖液(ph4.8)16 ml。使用時臨時將 a 液與 b 液混合(5:2)。
5．）中性紅-詹納斯綠 b 染液：
a: 將 3 滴詹納斯綠 b 飽和水溶液(溶解度 5.18％)加到 5ml 無水乙醇中，然后再加入 1ml 1:15000 中性紅溶液(中性紅 10mg 溶于
150ml 水中)，瓶子用黑紙包好，4℃冰箱保存。
[ 實驗步驟] 1．組織勻漿制備 肝臟用預冷的生理鹽水洗凈血污，用濾紙吸干。
稱取約 1 g 左右的肝組織，用預冷的 0.25 mol/l 的蔗糖溶液沖洗數(shù)次，剪碎。以預冷的 0.25 mol/l 的蔗糖溶液 4.5ml 懸浮剪碎的組織，移入勻漿器內(nèi)，在冰浴條件下勻漿（蔗糖溶液分數(shù)次加入）。（0.25 mol/l 的蔗糖溶液使肝臟細胞在勻漿的過程中處于低滲條件下，使得細胞更容易破碎，勻漿徹底）2.細胞器的分級分離 2.1 細胞核的分離：
將組織勻漿分裝到 1.5ml 離心管中，3000rpm,離心 10min，沉淀為細胞核及質(zhì)膜碎片。（上清液留作線粒體分離）2.2沉淀用1ml 0.25mol/l蔗糖溶液洗滌離心2次，每次4000r/min離心10min； 2.3 將沉淀用 500μl 0.34mol/l 蔗糖溶液懸浮，然后在懸液下輕輕加入0.88mol/l 蔗糖溶液 400μl，盡量使溶液分層，5000r/min 離心 15-20min； 2.4 用 pbs 溶液懸浮——涂片——干燥——95%乙醇固定（5min）——甲基綠-派洛寧染色 15-20min——放入丙酮分離 30s——蒸餾水漂洗——吸干鏡檢。
(2)線粒體的分離 將分離細胞核時收集的上清以 10000g 離心 10 min，棄去上清。沉淀用預冷的 0.25 mol/l 的蔗糖溶液 1ml 重懸后，10000g 離心 10 min，取沉淀。
(3)線粒體的鑒定 于潔凈載玻片上滴 1 滴中性紅-詹納斯綠 b 染液，用牙簽挑取線粒體沉淀均勻涂于染液中，染色 5-10 min，蓋上蓋玻片，鏡檢。
[ 結(jié)果與分析] 光學顯微鏡下觀察，可看到富集分離的細胞核，細胞核呈圓球形，核中央可見到兩個或多個被染成紅色的核仁，外圍的物質(zhì)被染成藍綠色；線粒體經(jīng)詹納斯綠 b染色呈藍綠色，呈棒狀或啞鈴狀。
[ 注意事項] 1．組織勻漿時，既要盡可能使細胞完全破碎，又要盡量快速。
2．在細胞器分離過程中，所有操作應盡可能在低溫下進行。
3．實驗過程應注意保持細胞器的完整性，避免操作過于劇烈。
[ 思考題] 1． 簡述細胞器分級分離的實驗原理和主要步驟？ 2．實驗操作中有哪些關(guān)鍵步驟和因素影響所得細胞器的含量和純度？
細胞工程實驗指導
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