2017年高考生物必備知識點：血紅蛋白的提取和分離

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血紅蛋白是高等生物體內(nèi)負責運載氧的一種蛋白質(zhì)(縮寫為Hb或HGB)。是使血液呈紅色的蛋白。血紅蛋白由四條鏈組成，兩條α鏈和兩條β鏈，每一條鏈有一個包含一個鐵原子的環(huán)狀血紅素。氧氣結(jié)合在鐵原子上，被血液運輸。血紅蛋白的特性是：在氧含量高的地方，容易與氧結(jié)合;在氧含量低的地方，又容易與氧分離。血紅蛋白的這一特性，使紅細胞具有運輸氧的功能。

一、蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：

1、樣品處理：包括洗滌紅細胞;血紅蛋白稀釋;離心等操作收集到的血紅蛋白溶液。

2、粗分離：透析除去分子較小的雜質(zhì)。

3、純化：通過凝膠色譜法將分子量較大的雜質(zhì)蛋白質(zhì)除去。

4、純度鑒定：通過聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定。

二、樣品處理

1、紅細胞的洗滌：

目的是去除雜蛋白。要加入檸檬酸鈉防止血液凝固;離心將血液分層，用膠頭吸管吸出黃色血漿;用生理鹽水洗滌。

2、血紅蛋白的釋放：

在蒸餾水和甲苯作用下，紅細胞破裂釋放

3、分離血紅蛋白溶液：

離心分層;濾紙過濾去除脂溶性沉淀層;分液漏斗分出紅色透明液體。

4、透析：

裝入透析袋并置于磷酸緩沖液中(PH為7.0)透析。

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